分子实验学习日记(一)——DNA粗提—盐析法 | 油脂營養成分查詢網
![分子实验学习日记(一)——DNA粗提—盐析法](https://i.imgur.com/47Cubpd.jpg)
2022年8月10日—一、基本原理DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解而使杂质沉淀,以达到分离目的 ...
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DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点 选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解而使杂质沉淀,以达到分离目的。DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后减小,在DNA溶解度最低时DNA从溶液中析出而其他杂质还留在溶液中,达到粗提取的目的。
二、实验步骤
1、加入250ul Edwards Buffer于离心管中;
2、将植物莲座叶或花序样品置入试管使其紧贴离心管内壁,使用已用NaOH浸泡的研磨棒,研磨至均匀、半透明状溶液;
3、在台式离心机中13000rpm离心10min;
4、取上清液200ul于新离心管中;
5、加入无水乙醇400ul-500ul(2-2.5倍)于新离心管,混匀,静置10min
6、在台式离心机中13000rpm离心10min;
7、将上清液倒入废液缸,离心管倒置于于纸上吸一下液体;
8、加入200ul 75%的乙醇,进行再次清洗;
9、在台式离心机中13000rpm离心5min;
10、将离心管置于离心机中short一下,再用移液器吸出多余的液体(可减少DNA烘干时间,非必须)
11、37℃烘干DNA沉淀;
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